MIC_101细胞缺氧小室提供了一种简单,低成本的方法来为您的细胞培养和实验创造合适的环境。 无论您想控制氧气水平,消除微孔板边缘的蒸发或混合气体以改变浓度,Billups-Rothenberg模块化培养箱室都是一种经济实惠,易于使用的解决方案。 该气密室在全球被使用了二十年,并被数千篇论文引用,在安全性和可靠性方面拥有良好的记录
首先,缺氧小室的安装和充气,您可以先观看操作视频:尽量使用单向流量计,以控制向小室充气的流速。调节流量计和气瓶上的调节器,使气体流速为20-25 L/min(最大流速为25 L/min)。将流量计的出气管与缺氧小室连接。所以首次充气时,要将两边夹子都打开,进行充气,保持 10 L/min流速,充气4-5分钟后,将流量计与缺氧小室分开,闭合入气管和出气管上的塑料夹(白色)来密封缺氧小室,这时候再把小室放回培养箱即可。
正常给小室充气后,在室温下(15 - 25℃)密封缺氧小室,然后置于37℃培养箱中1小时。最后把缺氧小室取出,将泵管(Tygon tubing)靠近耳朵,打开管夹(Tubing Clamp)倾听气体泄露的声音,如果听到的是“噗”的一声而非连续不断的漏气声,则说明密封很好。如果小室密封不好,可能需要调整环形夹钳(Ring Clamp)。松开环形夹钳的锁紧螺母,顺时针旋转螺栓拧紧,调整完毕后拧紧螺母即可。
缺氧小室一旦密封,我们验证过2-3周内,不会有气体泄漏或与外部环境有气体交换。由于培养瓶和培养基中气体的扩散或交换,气体成分可能会发生非常微小的变化。因此对于放了很多细胞培养皿的小室,我们建议在孵育一小时后再次充气,以除去残留在培养皿中的气体。
因为充气过程中,两边夹子打开,属于开放系统,所以不会存在小室爆炸的安全隐患。
缺氧小室一旦密封,我们验证过2周内,不会有气体泄漏或与外部环境有气体交换。由于培养瓶和培养基中气体的扩散或交换,气体成分可能会发生非常微小的变化。因此对于放了很多细胞培养皿的小室,我们建议在孵育一小时后再次充气,以除去残留在培养皿中的气体。